pod活性测定因素（pod活性的测定意义）

原标题：pod活性测定因素（pod活性的测定意义）

导读：

果蔬中过氧化物酶活性的测定1、实验所需材料包括各种果蔬，以及研磨设备、离心机、分光光度计等仪器，以及醋酸缓冲液、愈创木酚、H2O2等试剂。具体制备过程中，需先制备酶液，通过研...

果蔬中过氧化物酶活性的测定

1、实验所需材料包括各种果蔬，以及研磨设备、离心机、分光光度计等仪器，以及醋酸缓冲液、愈创木酚、H2O2等试剂。具体制备过程中，需先制备酶液，通过研磨果蔬并离心提取酶提取液，然后进行活性测定，通过在特定波长下测定吸光度变化，计算出每分钟吸光度变化值，以此确定过氧化物酶的活性。

2、果蔬中过氧化物酶活性的测定主要通过愈创木酚法进行。具体方法和注意事项如下：测定方法：原理：过氧化物酶催化H2O2氧化酚类物质，产生有色化合物。在愈创木酚法中，Pod催化H2O2将愈创木酚氧化为红棕色的4邻甲氧基苯酚，该物质在470 nm处有高光吸收，因此可利用比色法测量其活性。

3、在测定过氧化氢酶活力时，我们通常会测量反应溶液在特定波长下的吸光度值。随着过氧化氢酶的活性增加，反应溶液的吸光度会随时间而降低。根据吸光度的变化，可以计算出过氧化氢酶的活性单位，通常以每克鲜重（FW）果蔬样品每分钟吸光度变化值增加1时为1个过氧化物酶活性单位（U）。

植物 组织 POD活性的测定注意事项

待测样品中不能含有酶抑制剂，同时需避免反复冻融。 pod酶液提取时，注意低温操作，防止酶活性。以煮沸的酶液为对照时，酶要充分失活。 POD氧化剂具有一定腐蚀性，请小心操作。 POD氧化剂易挥发，请密闭保存，否则检测效率下降。如果没有分光光度计，也可以使用普通的酶标仪测定，每次检测指标不宜过多，否则操作时间不一，有可能导致样本间的差异。

植物体内过氧化物酶（POD）活性的测定通常采用光度法或荧光法。光度法：将植物组织或提取物加入含有过氧化氢和双甲基苯酚的反应液中，过氧化物酶催化过氧化氢分解产生的游离基与双甲基苯酚发生氧化反应，生成苯醌衍生物，产生黄色或棕色的化合物。可以通过测定反应液的吸光度或比色板的读数来测定POD活性。

植物POD活性的正常范围是440.327~52463U/g。这个范围是通过对大量植物样品的测量得出的平均值和标准差。POD活性的单位是U/g，表示每克植物组织中的过氧化物酶活性。POD活性的测量通过酶学方法进行，常用的是测定POD催化反应产生的染色产物的吸光度变化。这种测量方法可以反映出植物体内POD的活性水平。

过氧化物酶（Peroxidase，POD）活性测定POD活性测定采用愈创木酚法（Lurie等，1997）。用酶标仪进行测定时按比例调整为总反应体积为400μL。反应体系为30μL粗酶液，290 L 0.3%愈创木酚（用50 mmol/L的PBS配制，pH 4）和 80L0.3%H2O2（用50 mmol/L的PBS配制，pH 4）。

pod活性酶，即过氧化物酶，是植物体内的一种重要活性酶。以下是关于过氧化物酶的详细解存在范围：过氧化物酶广泛存在于各类植物中，是植物体内不可或缺的活性酶之一。生理功能：参与生命过程：过氧化物酶参与了呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等多个重要生命过程。

活性氧包括超氧阴离子（O2-）、羟基自由基（OH·）、过氧阴离子（ROO·）、烷氧自由基（RO·）、过氧化氢（H2O2）和单线态氧（O21*）等。植物通过酶促和非酶促防御系统对抗活性氧的积累。

pod酶活性测定方法

1、pod酶活性测定方法有定时法、连续监测法、平衡法。定时法通过测定酶反应开始后某一时间段内（t1到t2）产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法。其中t1往往取反应开始的时间。该法最基本的一点是停止反应后才测定底物或物的变化。优点：简单易行，对试剂要求不高。缺点：难保证测定结果的真实性。

2、pod活性是测得出来的。pod，即过氧化物酶，它的活性测定方法是：称取1g鲜样，加0.1mol/LTris-HCl磷酸缓冲液，1300g、4℃下离心20min，采用分光光度法测定上清液中的酶活性。

3、植物体内过氧化物酶（POD）活性的测定通常采用光度法或荧光法。光度法：将植物组织或提取物加入含有过氧化氢和双甲基苯酚的反应液中，过氧化物酶催化过氧化氢分解产生的游离基与双甲基苯酚发生氧化反应，生成苯醌衍生物，产生黄色或棕色的化合物。可以通过测定反应液的吸光度或比色板的读数来测定POD活性。

4、POD过氧化物酶活性（参考Chance等[11]的方法）A. 酶液制备0.25g芽（剥除鳞片），加入0.0lg pvp， 5mL 0.lmol/L磷酸盐缓冲液（pH8，含有0.2mmo1/L EDTA， 0.4mmo1/L β-巯基乙醇）冰浴研磨，低温（4℃）.12000r/min离心10min后，所得上清液为待测液。